01大分子藥物簡(jiǎn)介

大分子藥物以蛋白質(zhì)、多肽、抗體、核酸等為**，憑借高特異性和靶向性成為現(xiàn)**物制藥的**領(lǐng)域。然而其復(fù)雜的三維結(jié)構(gòu)（如蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)、抗體的糖基化修飾）對(duì)生產(chǎn)過(guò)程控制和質(zhì)量分析提出嚴(yán)苛要求。在線拉曼光譜技術(shù)通過(guò)實(shí)時(shí)捕獲分子振動(dòng)光譜信息，實(shí)現(xiàn)從分子結(jié)構(gòu)解析到生產(chǎn)過(guò)程監(jiān)控的全鏈條應(yīng)用，成為大分子藥物開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵使能技術(shù)。

02拉曼光譜的原理

拉曼光譜技術(shù)基于拉曼散射效應(yīng)。當(dāng)一束單色光照射到樣品上時(shí)，大部分光子與樣品分子發(fā)生彈性碰撞，光子的能量和頻率保持不變，這種散射稱為瑞利散射；而少部分光子與樣品分子發(fā)生非彈性碰撞，光子的能量發(fā)生改變，其頻率也相應(yīng)地發(fā)生變化，這種散射即為拉曼散射。不同的分子具有獨(dú)特的拉曼光譜特征，如同分子的“指紋”，通過(guò)對(duì)拉曼光譜的分析，就可以實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品成分和結(jié)構(gòu)的定性和定量分析。

03發(fā)酵與細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)

關(guān)鍵代謝物與細(xì)胞狀態(tài)分析

布魯克在線拉曼SuperFlux?（SFx）通過(guò)浸入式探頭或流通池設(shè)計(jì)，可原位監(jiān)測(cè)發(fā)酵液中的葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺等代謝物濃度，以及活細(xì)胞密度（VCD）、細(xì)胞活率（VIB）等關(guān)鍵參數(shù)。例如，在CHO細(xì)胞培養(yǎng)中，拉曼光譜能捕捉細(xì)胞代謝波動(dòng)，結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)模型實(shí)現(xiàn)補(bǔ)料策略的動(dòng)態(tài)優(yōu)化，從而提升目標(biāo)產(chǎn)物的表達(dá)量和一致性。

產(chǎn)物糖基化特征的實(shí)時(shí)追蹤

ProcessGuardian?Raman光譜儀*多有8個(gè)探頭監(jiān)測(cè)關(guān)鍵參數(shù)，蛋白質(zhì)糖基化是抗體類藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQA）。TornadoHTVS技術(shù)通過(guò)增強(qiáng)拉曼信號(hào)強(qiáng)度，可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)糖基化多個(gè)位點(diǎn)的特征峰（如1676cm?1處的C=O振動(dòng)），幫助控制糖基化異質(zhì)性，確保藥物的藥效和免疫原性。

層析過(guò)程的動(dòng)態(tài)優(yōu)化

在ProteinA純化或離子交換層析中，在線拉曼可在線監(jiān)測(cè)洗脫曲線，通過(guò)特征峰識(shí)別目標(biāo)抗體的洗脫窗口，避免過(guò)度洗脫導(dǎo)致的收率損失。例如，在抗體純化中，1650cm?1處的酰胺I帶可用于實(shí)時(shí)定量，結(jié)合多元數(shù)據(jù)分析實(shí)現(xiàn)洗脫終點(diǎn)的智能判定。

04總結(jié)

拉曼光譜技術(shù)能夠收集分子層面的信息。超越了紫外線檢測(cè)，因?yàn)槠涮峁┑男畔⒛軓姆肿訉用姹碚骱蛥^(qū)分不同物質(zhì)，能夠?qū)崿F(xiàn)物質(zhì)的區(qū)分以及特定的定量分析。